霉菌毒素之赭曲霉毒素介紹

      近年來，霉菌毒素成為飼料、養(yǎng)殖業(yè)之殤。據(jù)調查，我國的全價飼料和飼料原料中霉菌毒素污染問題廣泛存在，同時污染幾種不同霉菌毒素的情況非常普遍，污染的水平足以給養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴重的經(jīng)濟損失。據(jù)潤牧生物近幾個月對不同地區(qū)的飼料原料及全價料中霉菌毒素檢測結果顯示：黃曲霉毒素不是主要問題，而玉米赤酶烯酮、嘔吐毒素和煙曲霉毒素的超標率很高，且污染水平很高，這意味著黃曲霉毒素有可能會慢慢淡化，而玉米赤酶烯酮、嘔吐毒素和煙曲霉毒素的危害越來越嚴重，赭曲霉毒素則可能成為霉菌毒素中的“后起之秀”。 

1  簡介
赭曲霉毒素(Ochratoxin，OT)是繼黃曲霉毒素之后又一個引起世界廣泛關注的霉菌毒素。曲霉菌屬的7種曲霉和青霉菌屬的6種青霉菌都能產(chǎn)生赭曲霉毒素，但主要由純綠青霉、赭曲霉和碳黑曲霉產(chǎn)生。赭曲霉毒素對腎臟、肝臟等有較強的毒性，具有致畸性，在霉變谷物、飼料及飼料原料中最常見，被畜、禽攝食后累積在體內(nèi)，通過食物鏈對人類健康構成嚴重的威脅。

2  化學結構與理化性質
2.1  化學結構
赭曲霉毒素包括7種結構類似的化合物，結構通式：R1=C1或H；R2=H、CH3或C2H5。依其發(fā)現(xiàn)順序有赭曲霉毒素A(OTA）、赭曲霉毒素B(OTB）和赭曲霉毒素C(OTC）等，OTB是OTA的脫氯衍生物，OTC是OTA的乙基酯。其中赭曲霉毒素A(R1=C1，R2=H）毒性最大、分布最廣、產(chǎn)毒量最高、對農(nóng)產(chǎn)品的污染最重、與人類健康關系最密切。
魏潤蘊等和孫惠蘭等分別從糧食和配合飼料中提出OTA純品。分析表明OTA由7-羧-5-氯-8-羥-3，4-二氫-R-甲基異香豆素和L-β-苯丙氨酸通過肽鍵連接而成（赭曲霉毒素A的化學結構如下圖），分子式：C20H18ClNO6，分子量403。
2.2  理化性質
赭曲霉毒素A（OTA）是一種無色針狀結晶化合物，有很高的化學穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性，焙烤只能使其毒性減少20%，蒸煮對其毒性不具有破壞作用。酸性條件下溶于苯、三氯甲烷和稀碳酸氫鈉溶液，微溶于水、石油醚；其鹽溶于水。將OTA的乙醇溶液貯于冰箱中一年以上也無損失，但應避光保存，如接觸紫外線，幾天就會分解。在紫外線照射下OTA和OTB分別呈綠色和藍色熒光，最大吸收峰分別為333nm和318nm。

3  病變機理
3.1  赭曲霉毒素A阻斷氨基酸t(yī)RNA合成酶從而影響蛋白質合成，使得IgA、IgG和IgM減少，抗體效價降低。
3.2  損傷禽類法氏囊和畜禽腸道淋巴組織，降低抗體的產(chǎn)量，影響體液免疫，這和赭曲霉毒素的致癌作用有關。
3.3  引起粒細胞吞噬能力降低，從而影響吞噬作用和細胞免疫。
3.4  赭曲霉毒素A能通過胎盤影響胎兒組織器官的發(fā)育和成熟。

4  赭曲霉毒素的污染
赭曲霉毒素的毒性強弱順序是：OTA>OTC>OTB。
4.1  植物產(chǎn)品
該毒素主要污染多種農(nóng)作物和食品，如燕麥、大麥、小麥、玉米、豆類及豆制品、干果、咖啡、葡萄及葡萄酒、油料作物、啤酒、茶葉和動物飼料等，尤其在大麥中廣泛存在。一般情況下，飼料污染比食物污染嚴重。正常條件下，小麥和玉米受OTA污染的機率較小，約1%～5%，其含量為0.01mg/kg～5mg/kg；大麥和燕麥被污染的機率較高，約為10%，其含量一般在0.1mg/kg以下，個別樣品高達27mg/kg。GB 13078.2--2006 規(guī)定配合飼料和玉米中OTA≤100ug/kg。 OTB和OTC在被污染飼料中的含量一般較低，對大多數(shù)動物的毒性較OTA小。因此，飼料檢測時可以不考慮，主要分析OTA含量。
赭曲霉、圓弧青霉和鮮綠青霉菌均可產(chǎn)生OTA。OTA的產(chǎn)生菌在濕熱的南方一般以赭曲霉菌為主，侵害水分大于16%的糧食和飼料；而寒冷于燥的北方以青霉菌為主，有些青霉菌在0℃左右仍能生長，給飼料貯藏帶來極大困難。赭曲霉在花生餅和大豆餅中的產(chǎn)毒量，顯著高于在小麥和玉米中的產(chǎn)毒量。  
4.2  動物產(chǎn)品
動物攝食含有OTA的飼料后會導致體內(nèi)OTA的蓄積，因此，通常可在動物性食品尤其是豬腎臟、肝臟、肌肉、血液以及奶和奶制品中可檢出，其污染程度與不同季節(jié)收獲的大麥濕度呈正相關關系.

5   OTA的毒性及危害
5.1  急性毒性
OTA對實驗動物半數(shù)致死量（LD50mg/kg BW）因給藥途徑、實驗動物的食物、年齡、性別的不同而異。據(jù)研究，豬、狗對OTA特別敏感，反芻動物不敏感。赭曲霉毒素中毒癥的主要癥狀為：最初主要為食欲減退、生長遲緩、惡心、嘔吐，飼料效率降低，緊接著直腸溫度升高、結膜炎發(fā)膿、扁桃腺炎，因為肝臟受損，特別是對腎臟的影響，導致飲水量增加（劇渴），排尿增多（多尿癥），脫水、俯臥，最后死亡。幼齡生長豬會出現(xiàn)腎周水腫，并伴有僵硬。胃潰瘍也是常見的癥狀。公豬的精子質量降低，受精率下降，最終導致整體繁殖性能下降。
5.2  慢性毒性
用含低劑量OTA的日糧飼喂豬只數(shù)天，豬的健康狀況良好，但食欲減退，體重增加緩慢，飲水和排尿量增加；轉用正常飼料飼喂幾周后，豬的生產(chǎn)性能又恢復正常。日糧赭曲霉毒素的含量為1mg/kg左右時，家禽產(chǎn)蛋量和蛋殼品質下降，增加血斑蛋和肉斑蛋的百分比；超過5mg/kg時便會損壞肝臟組織和腸道。
5.3  免疫學毒性
動物在攝入OTA后，能引起免疫抑制，淋巴細胞特別是胸腺、脾臟、法氏囊的淋巴細胞減少，噬菌細胞凋亡加速，致使巨噬細胞吞噬能力減弱。
5.4  致畸和致癌
OTA對老鼠是一種強烈的致畸物質，對豬無效。雌性動物吃了含OTA的食物，其后代的神經(jīng)中樞、眼睛、軸骨會受到不同程度的影響。

6  赭曲霉毒素的防治
6.1  預防真菌的滋生
影響霉菌毒素生長的因素主要有：濕度、溫度、時間、谷物的損傷、氧氣和二氧化碳的濃度、基質的成分、真菌的數(shù)量、產(chǎn)毒菌株等，其中主要是溫度和濕度。在貯存谷物時應控制濕度小于15%，或保證高濕度時厭氧條件，亦可加入霉菌毒素抑制劑等均能有效控制OTA的產(chǎn)生。
6.2  化學脫毒和青貯法
酸、堿、乙醛、硫酸氫鹽、氧化劑、各種氣體（如氨氣）和青貯法等都可用來降低或滅活霉菌毒素。
6.3  吸附劑脫毒
硅鋁酸鈣氫鈉、班脫土、木炭、硝膽氨等均可用來降低OTA的毒性。目前比較有效的是在飼料中添加一定比例的硅鋁酸鈣氫鈉和班脫土。
除上述方法外，還可采用微生物脫毒法（如酵母）、維生素C脫毒法、苯丙氨酸和蛋白質脫毒法等都比較理想，但蛋白質脫毒會增加飼養(yǎng)成本，降低利潤。

7  結語 
赭曲霉毒素是強致癌物質，能引起動物的急性或慢性毒性，對腎臟可造成不可逆的致死毒害，使腎臟萎縮，還可使胎兒畸形、流產(chǎn)甚至死亡，在影響動物生長機能的同時，通過食物鏈對人類也造成嚴重的危害，因此必須加以重視。

  飛測生物基于熒光免疫層析技術平臺，推出飼料中赭曲霉素A熒光快速檢測試紙條和赭曲霉素A熒光定量檢測試紙條。本產(chǎn)品可快速檢測包括花生、玉米、小麥等飼料原料及部分飼料成品中赭曲霉素A的含量，檢測限可在10-200ng/mL范圍內(nèi)根據(jù)客戶的內(nèi)控標準進行調整，樣品無需前處理，操作簡便，采用熒光讀數(shù)儀讀數(shù)，結果準確可靠，適用于各類飼料加工企業(yè)及檢測機構。

【飼料中赭曲霉素A熒光定量檢測試紙條產(chǎn)品性能】
1、 靈敏度：5ng/mL；
2、 定量線性范圍：10.0ng/mL - 200.0 ng/mL（定量范圍可根據(jù)客戶需求進行調整）；
3、 準確度：添加回收率為80%-125%；
4、 特異性：在1000 ng/mL濃度水平下與其它真菌毒素無交叉反應；

1、 檢測限：100.0ng/mL（可根據(jù)客戶內(nèi)控標準在10-200 ng/mL范圍內(nèi)進行調整）；
2、 準確度：≥99.5%；
3、 特異性：在1000 ng/mL濃度水平下與其它真菌毒素無交叉反應；

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