真菌毒素在樣本中不均的處理方案——樣本誤差來源

　　在日常真菌毒素檢測(cè)中，無論是快檢方法還是高效液相色譜法等國標(biāo)方法，都經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)同一批貨物多次取樣檢測(cè)結(jié)果差異，或者同一份抽檢的樣本多次稱樣檢測(cè)結(jié)果有差異，甚至在檢測(cè)同一份粉碎樣本每次稱樣檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)差異的情況。

　　真菌毒素檢測(cè)誤差一直是糧油、飼料等領(lǐng)域令化驗(yàn)人員非常頭疼的問題，有時(shí)甚至?xí)_(dá)到百分之幾百的偏差，誤差的來源和影響因素非常之多，如檢測(cè)產(chǎn)品本身、操作流程和細(xì)節(jié)掌握程度、實(shí)驗(yàn)環(huán)境和條件、不同種類樣品的基質(zhì)效應(yīng)等，其中影響最大的一個(gè)因素就是樣本本身毒素分布的均一性。

　　如何去降低毒素均一性問題導(dǎo)致檢測(cè)的誤差，并通過簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證判斷樣本的檢測(cè)結(jié)果差異是否是由于樣本均一性問題導(dǎo)致的就顯得尤為重要。

　　樣本誤差來源

　　樣本因素：

　　糧食生霉粒、霉變粒含量的高低與真菌毒素含量多少無明顯正相關(guān)性，不可通過霉變情況判斷真菌毒素含量，真菌毒素檢測(cè)值高低主要與糧食是否感染產(chǎn)毒霉菌有關(guān) 。糧食在生長(zhǎng)、運(yùn)輸、存儲(chǔ)和加工等環(huán)節(jié)都會(huì)受到真菌入侵，在宿主、光照、溫度、水分活度等適宜環(huán)境條件下，產(chǎn)毒霉菌會(huì)產(chǎn)生真菌毒素。

　　真菌毒素是由產(chǎn)毒真菌在一定環(huán)境下產(chǎn)生的毒性次級(jí)代謝產(chǎn)物，其產(chǎn)生的隨機(jī)性和不確定性很大，產(chǎn)生后的毒素也看不見摸不著，具有高度的隱蔽性這直接導(dǎo)致真菌毒素在谷物及制品中的分布不均一。真菌毒素通常只有 ppm 或 ppb 級(jí)別(ppm 級(jí)別相當(dāng)于32 kg 糧食中的一顆)，因此真菌毒素污染的這些特點(diǎn)致使準(zhǔn)確分析整體谷物中真菌毒素的含量、正確客觀評(píng)價(jià)真菌毒素的污染水平變得十分困難。

　　檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊中發(fā)表的《樣品扦樣與制備-真菌毒素準(zhǔn)確分析中的決定性因素》中表明，通常只有少部分的顆粒受到真菌毒素污染，但污染的顆粒上卻含有較高的真菌毒素含量。如對(duì)花生、玉米籽粒等大量的農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果表明，某些大宗產(chǎn)品中被污染的顆粒比例非常小(0.1%)，但污染的顆粒中真菌毒素含量極高。有些花生粒上黃曲霉毒素的含量超1000000ng/g，在一個(gè)玉米粒中發(fā)現(xiàn)超過400000ng/g的黃曲霉毒素。

　　抽樣因素

　　同其他檢測(cè)項(xiàng)目一樣，真菌毒素含量的檢測(cè)也包括扦樣、制樣、分析檢測(cè)等步驟。每個(gè)步驟都會(huì)不可避免的引入誤差，對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成直接或間接的影響。

　　扦樣是糧食真菌毒素檢測(cè)的第一步，直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，如果扦樣方法不合理、樣品數(shù)量不具代表性，任何精密儀器的分析結(jié)果將毫無意義。

　　制樣環(huán)節(jié)的主要誤差是樣品的均一性，在糧食入庫時(shí)節(jié)，基層檢驗(yàn)員在使用快檢設(shè)備進(jìn)行真菌毒素檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)，同一樣品的不同粉末檢測(cè)結(jié)果相差較大，而取同一提取液的檢測(cè)結(jié)果平行性良好，制粉的均一性問題給收糧工作帶來很大困擾，尤其是對(duì)超標(biāo)附近的檢測(cè)結(jié)果難以把控。從真菌毒素在糧食顆粒的分布來看，不同部位含量也有所差異。對(duì)一批黃曲霉毒素超標(biāo)的稻谷進(jìn)行液相分析，發(fā)現(xiàn)碾磨后的精米中黃曲霉毒素B1含量在正常范圍內(nèi)，糙米中黃曲霉毒素B1含量較高，而糠粉中黃曲霉B1含量最高，且占稻谷籽粒黃曲霉毒素B1含量的90%。

　　次級(jí)分析樣品的取樣量也會(huì)對(duì)真菌毒素的檢測(cè)結(jié)果造成影響。對(duì)總體黃曲霉污染水平為20ug/kg的樣品進(jìn)行薄層色譜分析，發(fā)現(xiàn)次級(jí)分析樣品的取樣量從50g提高到100g，測(cè)定結(jié)果范圍(20~36.9)ug/kg降低為(20~20.5)ug/kg ，適當(dāng)提高次級(jí)分析樣品的取樣量，可減少真菌毒素的分析誤差。

　　對(duì)于真菌毒素您有何看法呢?

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