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真菌毒素在樣本中不均的處理方案——樣本誤差來源

時間:2024-08-09來源:點擊量:

  在日常真菌毒素檢測中,無論是快檢方法還是高效液相色譜法等國標(biāo)方法,都經(jīng)常會出現(xiàn)同一批貨物多次取樣檢測結(jié)果差異,或者同一份抽檢的樣本多次稱樣檢測結(jié)果有差異,甚至在檢測同一份粉碎樣本每次稱樣檢測結(jié)果出現(xiàn)差異的情況。

  真菌毒素檢測誤差一直是糧油、飼料等領(lǐng)域令化驗人員非常頭疼的問題,有時甚至?xí)_到百分之幾百的偏差,誤差的來源和影響因素非常之多,如檢測產(chǎn)品本身、操作流程和細(xì)節(jié)掌握程度、實驗環(huán)境和條件、不同種類樣品的基質(zhì)效應(yīng)等,其中影響最大的一個因素就是樣本本身毒素分布的均一性。


  如何去降低毒素均一性問題導(dǎo)致檢測的誤差,并通過簡單的實驗驗證判斷樣本的檢測結(jié)果差異是否是由于樣本均一性問題導(dǎo)致的就顯得尤為重要。

  樣本誤差來源

  樣本因素:

  糧食生霉粒、霉變粒含量的高低與真菌毒素含量多少無明顯正相關(guān)性,不可通過霉變情況判斷真菌毒素含量,真菌毒素檢測值高低主要與糧食是否感染產(chǎn)毒霉菌有關(guān) 。糧食在生長、運輸、存儲和加工等環(huán)節(jié)都會受到真菌入侵,在宿主、光照、溫度、水分活度等適宜環(huán)境條件下,產(chǎn)毒霉菌會產(chǎn)生真菌毒素。

  真菌毒素是由產(chǎn)毒真菌在一定環(huán)境下產(chǎn)生的毒性次級代謝產(chǎn)物,其產(chǎn)生的隨機性和不確定性很大,產(chǎn)生后的毒素也看不見摸不著,具有高度的隱蔽性這直接導(dǎo)致真菌毒素在谷物及制品中的分布不均一。真菌毒素通常只有 ppm 或 ppb 級別(ppm 級別相當(dāng)于32 kg 糧食中的一顆),因此真菌毒素污染的這些特點致使準(zhǔn)確分析整體谷物中真菌毒素的含量、正確客觀評價真菌毒素的污染水平變得十分困難。

  檢驗檢疫學(xué)刊中發(fā)表的《樣品扦樣與制備-真菌毒素準(zhǔn)確分析中的決定性因素》中表明,通常只有少部分的顆粒受到真菌毒素污染,但污染的顆粒上卻含有較高的真菌毒素含量。如對花生、玉米籽粒等大量的農(nóng)產(chǎn)品檢測結(jié)果表明,某些大宗產(chǎn)品中被污染的顆粒比例非常小(0.1%),但污染的顆粒中真菌毒素含量極高。有些花生粒上黃曲霉毒素的含量超1000000ng/g,在一個玉米粒中發(fā)現(xiàn)超過400000ng/g的黃曲霉毒素。


  抽樣因素

  同其他檢測項目一樣,真菌毒素含量的檢測也包括扦樣、制樣、分析檢測等步驟。每個步驟都會不可避免的引入誤差,對檢測結(jié)果造成直接或間接的影響。

  扦樣是糧食真菌毒素檢測的第一步,直接影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,如果扦樣方法不合理、樣品數(shù)量不具代表性,任何精密儀器的分析結(jié)果將毫無意義。


  制樣環(huán)節(jié)的主要誤差是樣品的均一性,在糧食入庫時節(jié),基層檢驗員在使用快檢設(shè)備進行真菌毒素檢測時發(fā)現(xiàn),同一樣品的不同粉末檢測結(jié)果相差較大,而取同一提取液的檢測結(jié)果平行性良好,制粉的均一性問題給收糧工作帶來很大困擾,尤其是對超標(biāo)附近的檢測結(jié)果難以把控。從真菌毒素在糧食顆粒的分布來看,不同部位含量也有所差異。對一批黃曲霉毒素超標(biāo)的稻谷進行液相分析,發(fā)現(xiàn)碾磨后的精米中黃曲霉毒素B1含量在正常范圍內(nèi),糙米中黃曲霉毒素B1含量較高,而糠粉中黃曲霉B1含量最高,且占稻谷籽粒黃曲霉毒素B1含量的90%。

  次級分析樣品的取樣量也會對真菌毒素的檢測結(jié)果造成影響。對總體黃曲霉污染水平為20ug/kg的樣品進行薄層色譜分析,發(fā)現(xiàn)次級分析樣品的取樣量從50g提高到100g,測定結(jié)果范圍(20~36.9)ug/kg降低為(20~20.5)ug/kg ,適當(dāng)提高次級分析樣品的取樣量,可減少真菌毒素的分析誤差。

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