原理簡介
免疫層析法 (Immunochromatography)是九十年代興起的一種基于免疫膠體金技術(shù)的快速診斷技術(shù),實質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到納米金顆粒表面的包被過程。
吸附機理可能是納米金顆粒表面負(fù)電荷,與蛋白質(zhì)的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結(jié)合,而且吸附后不會使生物分子變性,由于金顆粒具有高電子密度的特性,在金標(biāo)蛋白結(jié)合處,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒,當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時,肉眼可見紅色或粉紅色斑點,因而用于定性或半定量的快速免疫檢測方法中。
由于球形的納米金粒子對蛋白質(zhì)有很強的吸附功能,可以與葡萄球菌A 蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白等非共價結(jié)合,因而在基礎(chǔ)研究和實驗中成為非常有用的工具。
免疫層析是以NC膜為載體,利用微孔膜的毛細管作用,使滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移,如同層析一般。金磁微粒復(fù)合物干片粘連在近NC膜條下端(C),膜條測試區(qū)(T)包有特異抗體,當(dāng)試紙條下端進入液體標(biāo)本樣中,下端吸水材料吸取液體向上端移動,流經(jīng)C處時,使干片上的金磁微粒復(fù)合物復(fù)溶,并帶動其向膜條滲移,若標(biāo)本有特異性抗原時,可與金磁微粒復(fù)合物的抗體結(jié)合,形成的金標(biāo)抗原—抗體復(fù)合物流至測試區(qū),被固相抗體所捕獲,形成抗體—抗原—金標(biāo)抗體復(fù)合物,在膜上T處出現(xiàn)紅色控制線。